雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀是一種用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的儀器

更新時間：2023-03-09 點擊次數(shù)：751

　　雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀是一種用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的儀器。在分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)研究中，需要對細(xì)胞進(jìn)行外源性DNA、RNA的導(dǎo)入，可以快速地實現(xiàn)外源性DNA、RNA等分子的導(dǎo)入，為科學(xué)家們提供了較為簡單細(xì)胞轉(zhuǎn)染手段。當(dāng)然，在實驗過程中要注意安全規(guī)范，同時積極進(jìn)行技術(shù)優(yōu)化與設(shè)備維護(hù)，以取得更加準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，以達(dá)到基因敲除、表達(dá)等功能，這就需要采用各種工具來完成細(xì)胞膜的穿透和細(xì)胞轉(zhuǎn)染。依靠高壓脈沖電場作用于細(xì)胞時產(chǎn)生的短暫通道效應(yīng)將載體DNA或siRNA等物質(zhì)導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)。

　　雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀操作步驟：

　　1.準(zhǔn)備穿孔室，并注入上述包含DNA或RNA的溶液。

　　2.在系統(tǒng)開啟前對通道線路進(jìn)行檢查，確保線路連接穩(wěn)定且指示燈正常運行。

　　3.將含有目標(biāo)細(xì)胞的懸浮液加入離子體。

　　4.使用裝置進(jìn)行預(yù)設(shè)處理條件的優(yōu)化(如選擇不同的脈沖電場強度、持續(xù)時間、寬度、頻率等參數(shù))，根據(jù)實驗需要進(jìn)行選擇，并記錄下設(shè)定參數(shù)。

　　5.將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸浮液放入穿孔室中，在設(shè)定好的條件下進(jìn)行穿孔操作。

　　6.實驗結(jié)束后清洗設(shè)備及穿孔室。

　　7.將處理后的細(xì)胞用適當(dāng)培養(yǎng)基保存并觀察。

　　雙波懸浮細(xì)胞電穿孔儀注意事項：

　　·進(jìn)行轉(zhuǎn)染時，務(wù)必使用無菌實驗方式，以避免微生物對細(xì)胞的影響。

　　·在實驗過程中要注意細(xì)胞的狀態(tài)和數(shù)量，并盡可能避免機械振動等情況的干擾。

　　·應(yīng)根據(jù)實驗需要逐步優(yōu)化電場條件，但同時注意不要超出細(xì)胞能承受的范圍，避免重大損傷甚至死亡。