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4-22
摘要研究探討電穿孔介導(dǎo)的基因治療對(duì)兔下頜骨牽引成骨(DO)的促進(jìn)作用。通過(guò)構(gòu)建攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)基因的重組質(zhì)粒,利用威尼德電穿孔儀轉(zhuǎn)染至牽引區(qū)組織,結(jié)合影像學(xué)、組織學(xué)及分子生物學(xué)分析。結(jié)果顯示,電穿孔組新骨形成速率及骨密度顯著高于對(duì)照組(P引言下頜骨牽引成骨技術(shù)通過(guò)機(jī)械牽引刺激骨組織再生,但其成骨效率受限于局部生物活性因子不足?;蛑委熗ㄟ^(guò)靶向遞送促生長(zhǎng)因子基因,有望突破這一瓶頸。電穿孔技術(shù)因其高效、低損傷的特性,逐漸成為非病毒基因遞送的研究熱點(diǎn)。然而,電穿...
4-22
摘要研究通過(guò)溶膠-凝膠法合成硅納米顆粒,并對(duì)其表面進(jìn)行氨基化修飾,探究其作為基因載體的性能。實(shí)驗(yàn)表明,氨基化硅納米顆粒粒徑均一(50±5nm),表面電位+28mV,可高效負(fù)載質(zhì)粒DNA(負(fù)載率90%)。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示,其轉(zhuǎn)染效率達(dá)65%,且細(xì)胞存活率高于85%。結(jié)果表明,氨基化修飾顯著提升基因遞送能力,為基因治療載體開(kāi)發(fā)提供新思路。引言基因治療作為精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的核心技術(shù),其關(guān)鍵挑戰(zhàn)在于開(kāi)發(fā)安全高效的基因遞送載體。病毒載體雖轉(zhuǎn)染效率高,但存在免疫原性和插入突變風(fēng)險(xiǎn);...
4-22
摘要研究針對(duì)牛結(jié)核病防控需求,開(kāi)發(fā)了一種基于活體電穿孔技術(shù)的DNA疫苗免疫接種方法。通過(guò)構(gòu)建含結(jié)核分枝桿菌抗原基因的重組質(zhì)粒,結(jié)合威尼德電穿孔儀優(yōu)化體內(nèi)遞送參數(shù),評(píng)估免疫效果。實(shí)驗(yàn)表明,電穿孔組血清抗體效價(jià)顯著高于傳統(tǒng)注射組,且T細(xì)胞免疫應(yīng)答增強(qiáng)。該方法為高效、安全的牛結(jié)核病疫苗研發(fā)提供了新策略。引言牛結(jié)核病是由牛分枝桿菌(Mycobacteriumbovis)引起的人畜共患病,嚴(yán)重威脅畜牧業(yè)發(fā)展和公共衛(wèi)生安全。傳統(tǒng)滅活疫苗存在免疫保護(hù)率低、安全性不足等問(wèn)題,而DNA疫苗因其...
4-22
摘要通過(guò)威尼德電穿孔儀介導(dǎo)質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染,探究其對(duì)小鼠皮膚及線性傷口基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)采用綠色熒光蛋白(GFP)報(bào)告基因質(zhì)粒,優(yōu)化電穿孔參數(shù),結(jié)合威尼德紫外交聯(lián)儀進(jìn)行組織固定分析。結(jié)果顯示,電穿孔顯著提升表皮及真皮層GFP表達(dá),并加速線性傷口愈合。結(jié)果表明,電穿孔技術(shù)可有效增強(qiáng)皮膚基因遞送效率,為創(chuàng)傷修復(fù)研究提供新策略。引言皮膚作為人體最大器官,其創(chuàng)傷修復(fù)與基因調(diào)控密切相關(guān)。傳統(tǒng)基因遞送方法(如病毒載體或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染)存在效率低、免疫原性高等局限性。電穿孔技術(shù)通過(guò)瞬時(shí)電場(chǎng)改變...
4-22
摘要惡性瘧原蟲基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染技術(shù)是研究其致病機(jī)制及抗瘧藥物開(kāi)發(fā)的重要工具。研究通過(guò)優(yōu)化電穿孔參數(shù)、篩選標(biāo)記基因及改進(jìn)體外培養(yǎng)條件,實(shí)現(xiàn)了惡性瘧原蟲紅細(xì)胞內(nèi)期的高效轉(zhuǎn)染。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀與分子雜交儀,結(jié)合某試劑完成質(zhì)粒遞送與基因整合驗(yàn)證。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染效率提升至15%,陽(yáng)性克隆篩選周期縮短至3周,為后續(xù)功能基因組學(xué)研究提供了可靠技術(shù)支撐。引言惡性瘧原蟲(Plasmodiumfalciparum)是導(dǎo)致人類瘧疾的主要病原體,其復(fù)雜的生命周期和基因調(diào)控機(jī)制使得基因編輯技術(shù)在其研...
4-21
摘要研究通過(guò)構(gòu)建p16基因過(guò)表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染至腎癌786-O細(xì)胞,探討p16對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲的影響。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀完成轉(zhuǎn)染,通過(guò)CCK-8、流式細(xì)胞術(shù)及Transwell模型分析生物學(xué)行為變化。結(jié)果顯示,p16過(guò)表達(dá)顯著抑制腎癌細(xì)胞增殖與遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯。本研究為腎癌靶向治療提供了潛在分子機(jī)制依據(jù)。引言腎細(xì)胞癌是泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤,具有高轉(zhuǎn)移性與化療耐藥特征。p16基因作為細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控因子,其失活與多種腫瘤進(jìn)展相關(guān)。已有研究表明,p16通過(guò)抑制CDK4...
4-21
摘要研究探討神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)經(jīng)TRAIL基因轉(zhuǎn)染后對(duì)膠質(zhì)瘤的抑制作用。通過(guò)威尼德電穿孔儀將TRAIL基因?qū)隢SCs,采用體外共培養(yǎng)及小鼠原位移植瘤模型評(píng)估其抑瘤效果。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染組腫瘤細(xì)胞凋亡率顯著升高(P引言膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤,傳統(tǒng)治療手段因血腦屏障限制及腫瘤異質(zhì)性難以。腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)可通過(guò)激活死亡受體選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,但其半衰期短且全身給藥易被清除。神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)具有腫瘤趨向性,可作為基因遞送載體靶向腫瘤微...
4-21
摘要在評(píng)估多藥耐藥基因(MDR1)修飾的造血干細(xì)胞(HSCs)移植至小鼠體內(nèi)的安全性。通過(guò)慢病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)對(duì)HSCs進(jìn)行修飾,結(jié)合威尼德電穿孔儀優(yōu)化轉(zhuǎn)染效率,隨后將細(xì)胞移植至輻照預(yù)處理小鼠中。結(jié)果顯示,移植后小鼠外周血細(xì)胞MDR1表達(dá)穩(wěn)定,未觀察到顯著毒性或免疫排斥反應(yīng),血液學(xué)指標(biāo)及臟器病理學(xué)分析均證實(shí)安全性良好。本研究為基因修飾干細(xì)胞臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言多藥耐藥(MDR)現(xiàn)象是腫瘤化療失敗的主要原因之一,而通過(guò)基因工程手段賦予造血干細(xì)胞耐藥特性,有望保護(hù)...